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Enzym-Design und Enzymmechanismen durch Modelling, site-directed Mutation, Überexpression und X-ray Analyse.

Kurzfassung


Die Überexpression dieser Gene liefert zum ersten Mal reine Enzyme der Naturstoffbiosynthese in ausreichenden Mengen (20-100 mg). In ferner Zukunft könnte deshalb die enzymkatalysierte Synthese von Sekundärstoffen attraktiver sein als deren schwierige Isolation. Ein besonders wichtiger Bereich unserer täglichen Forschung ist die molekulare Analyse dieser Enzyme um den Enzymmechanismus darzustellen, z. B. auch um die Substratakzeptanz zu erweitern und Katalysatoren für breitere Anwendung...Die Überexpression dieser Gene liefert zum ersten Mal reine Enzyme der Naturstoffbiosynthese in ausreichenden Mengen (20-100 mg). In ferner Zukunft könnte deshalb die enzymkatalysierte Synthese von Sekundärstoffen attraktiver sein als deren schwierige Isolation. Ein besonders wichtiger Bereich unserer täglichen Forschung ist die molekulare Analyse dieser Enzyme um den Enzymmechanismus darzustellen, z. B. auch um die Substratakzeptanz zu erweitern und Katalysatoren für breitere Anwendung herzustellen. "Site-directed" Mutation ist zur Routinearbeit unserer Gruppe geworden. Vor einem Jahr begannen wir mit Forschungen auf dem Gebiet der Enzymkristallisation. Heute sind wir in der Lage 3 Enzyme reproduzierbar zu kristallisieren. Eines unserer Hauptziele für die Zukunft ist die Überexpression von kompletten aus Pflanzen abgeleiteten Biosynthesewegen in prokaryotische Systeme, wie z. B. Bakterien, die effektiver arbeiten als Pflanzenzellen. Mattern-Dogru, E., Ma, X., Hartmann, J., Decker, H. and Stöckigt, J.: Potential active-site residues in polyneuridine aldehyde esterase, a central enzyme of indole alkaloid biosynthesis, by modelling and site-directed mutagenesis, Eur. J. Biochem., 269, 2889-2896 (2002).; Hefner, T., Stöckigt, J.: Probing suggested catalytic domains of NRD glycosyl-transferases by site-directed mutagenesis of arbutin synthase, Eur. J. Biochem., 270, 533-538 (2003).» weiterlesen» einklappen

  • Enzym-Design Enzymmechanismen Modelling site-directed Mutation X-ray Analyse

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